利用 X 射線三維顯微鏡對生物樣品進行掃描，能夠實現對生物組織結構的無損三維可視化分析，但樣品制備環節需遵循嚴格規范，才能獲取高質量成像數據。生物樣品具有含水量高、結構脆弱、對輻射敏感等特性，制樣過程需兼顧樣品完整性、成像清晰度與實驗性。

　　樣品的預處理是制樣基礎。首先要確保樣品的新鮮度，對于動植物組織，采集后需立即處理，減少因細胞自溶、腐敗等導致的結構變化。若無法及時掃描，可將樣品浸泡于合適的固定液中，如常用的 4% 多聚甲醛溶液，通過交聯蛋白質穩定細胞結構，防止在后續處理中發生變形。同時，需去除樣品表面雜質和多余組織，例如植物樣品要修剪掉多余的葉片和莖稈，動物組織需剔除表面脂肪和結締組織，以避免干擾成像并提高掃描效率。

　　控制樣品尺寸與形態是關鍵要點。X 射線三維顯微鏡的掃描視野和穿透能力有限，需根據設備參數對樣品進行合理切割。一般而言，樣品尺寸應控制在設備有效掃描范圍內，例如小型臺式設備通常適合直徑不超過 10mm、高度不超過 20mm 的樣品。對于較大樣品，可分割成多個小塊分別制樣。同時，要保證樣品形態規則，避免尖銳棱角或不規則凸起，防止局部過度吸收 X 射線，影響成像均勻性。此外，可將樣品嵌入合適的支撐介質中，如瓊脂糖凝膠或石蠟，既維持樣品形態穩定，又能輔助固定內部結構。

　　減少水分干擾對成像質量至關重要。生物樣品含水量高，而水對 X 射線吸收較強，易產生偽影。制樣時需采用脫水處理，常用梯度乙醇溶液（30%、50%、70%、85%、95%、100%）逐步置換樣品中的水分。脫水后，可進行臨界點干燥或冷凍干燥，去除殘余水分。對于無法脫水的含水樣品，如活細胞或組織切片，可采用低溫掃描或水窗成像技術，但需選擇合適的載樣容器，如超薄的聚丙烯酰胺水凝膠膜，既能固定樣品，又能減少水分對 X 射線的吸收。

　　防護與兼容性同樣不容忽視。X 射線對生物樣品有輻射損傷，長時間照射會破壞細胞結構，制樣時應盡量縮短掃描時間?？赏ㄟ^優化掃描參數，如降低 X 射線劑量、減少掃描層數，在保證成像質量的前提下，降低輻射對樣品的影響。同時，制樣過程中使用的試劑、支撐介質等材料需確保與 X 射線不發生反應，避免產生額外的干擾信號，影響成像結果的準確性 。